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對(duì)于GSH 酶聯(lián)免疫分析試劑盒的采集保存及反應(yīng)步驟,你夠了解嗎?
點(diǎn)擊次數(shù):970 更新時(shí)間:2022-09-27
GSH 酶聯(lián)免疫分析試劑盒的采集及保存
1、血清:標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜后于1000xg離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2、血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2-8°C1000x離心15分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3、組織勻漿:將動(dòng)物的組織標(biāo)本先用PBS洗滌,去除多余血液,勻漿化后放在20mLPBS中于-20°C放置過(guò)夜,第二天,經(jīng)過(guò)二次反復(fù)凍融破膜,將勻漿物5000xg離心5分鐘,取上清即可檢測(cè)。
4、細(xì)胞培養(yǎng)物上清:請(qǐng)離心后收集上清,并將標(biāo)本保存于-20℃,且應(yīng)避免反復(fù)凍融。
GSH 酶聯(lián)免疫分析試劑盒反應(yīng)步驟:
1、嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30~60min。
2、加樣后及時(shí)放人孵箱。標(biāo)本較多時(shí),要分批操作。按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間,防止孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)y以清洗*。
3、封板溫育時(shí),各孔一定要封嚴(yán),防止陽(yáng)性標(biāo)本的液體蒸發(fā),產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導(dǎo)致“花板"的出現(xiàn)。
4、用洗板機(jī)洗板時(shí),保證洗液注滿(mǎn)各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干:還要防止針口有纖維蛋白或異物,ELISA試劑盒這些異物在洗板的過(guò)程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)象而導(dǎo)致“花板"的出現(xiàn)。
5、合理安排檢測(cè)量,以免反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。
6、加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
7、顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用。
8、加樣時(shí)保持顯色劑不外流;A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
9、應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔,整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸。以上的措施可以使“花板"降至zui低限度。GSH 酶聯(lián)免疫分析試劑盒豚鼠從而提高檢測(cè)的特異性。并得到更準(zhǔn)確、可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
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