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E2檢測(cè)ELISA試劑盒競(jìng)爭(zhēng)法的操作步驟

點(diǎn)擊次數(shù)：1287 更新時(shí)間：2018-06-12

E2檢測(cè)ELISA試劑盒競(jìng)爭(zhēng)法可用于測(cè)定抗原，也可用于測(cè)定抗體。以測(cè)定抗原為例，受檢抗原和酶標(biāo)抗原競(jìng)爭(zhēng)與固相抗體結(jié)合，因此結(jié)合于固相的酶標(biāo)抗原量與受檢抗原的量成反比。

操作步驟如下：

（1）將特異抗體與固相載體連接，形成固相抗體。洗滌。
（2）待測(cè)管中加受檢標(biāo)本和一定量酶標(biāo)抗原的混合溶液，使之與固相抗體反應(yīng)。如受檢標(biāo)本中無(wú)抗原，則酶標(biāo)抗原能順利地與固相抗體結(jié)合。如受檢標(biāo)本中含有抗原，則與酶標(biāo)抗原以同樣的機(jī)會(huì)與固相抗體結(jié)合，競(jìng)爭(zhēng)性地占去了酶標(biāo)抗原與固相載體結(jié)合的機(jī)會(huì)，使酶標(biāo)抗原與固相載體的結(jié)合量減少。參考管中只加酶標(biāo)抗原，保溫后，酶標(biāo)抗原與固相抗體的結(jié)合可達(dá)zui充分的量。洗滌。
（3）加底物顯色：參考管中由于結(jié)合的酶標(biāo)抗原zui多，故顏色zui深。參考管顏色深度與待測(cè)管顏色深度之差，代表受檢標(biāo)本抗原的量。待測(cè)管顏色越淡，表示標(biāo)本中抗原含量越多。

ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行，每加入一種試劑孵育后，可通過(guò)洗滌除去多余的游離反應(yīng)物，從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。E2檢測(cè)ELISA試劑盒在實(shí)際應(yīng)用中，通過(guò)不同的設(shè)計(jì)，具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測(cè)抗體的間接法（圖a）、用于檢測(cè)抗原的雙抗體夾心法（圖b）以及用于檢測(cè)小分子抗原或半抗原的抗原競(jìng)爭(zhēng)法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。

1000ml Mould and Yeast Chromogenic Medium 用于霉菌和酵母菌的顯色培養(yǎng) 霉菌和酵母菌顯色培養(yǎng)基

250克 PDB 用于霉菌和酵母菌的培養(yǎng) 馬鈴薯葡萄糖肉湯

250 Salt Czapek Dox Agar 用于霉菌和酵母菌的計(jì)數(shù)(GB標(biāo)準(zhǔn)) 高鹽察氏瓊脂

250克 Salt Czapek Dox Agar 用于霉菌和酵母菌的計(jì)數(shù) 高鹽察氏培養(yǎng)基

250 Potato Dextrose Agar 用于霉菌、酵母菌計(jì)數(shù)(GB標(biāo)準(zhǔn)) 馬鈴薯葡萄糖瓊脂 (PDA)

250 Rose Bengal Medium 用于霉菌、酵母菌計(jì)數(shù) 玫瑰紅鈉瓊脂

250 YM Agar 用于霉菌、酵母菌及耐酸菌的分離培養(yǎng)(Acumedia方法) YM瓊脂

250 Tryptic Soy Fast Green Agar 用于濾膜細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定和分離培養(yǎng)(NEOGEN方法) 胰胨大豆胨固綠瓊脂

250g m-Endo Agar，LES 用于濾膜細(xì)菌計(jì)數(shù)(Merck方法) LES Endo 瓊脂

250 EF-18 Agar 用于濾膜法檢測(cè)食品中沙門氏菌(SN/T1059.1) EF-18 瓊脂

250克 M-Enerococcus Agar 用于濾膜法或直接平板法，從自來(lái)水、食品或其他標(biāo)本中分離腸球菌 M-腸球菌瓊脂
E2檢測(cè)ELISA試劑盒

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