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細(xì)胞簡(jiǎn)介：

甲狀旁腺是哺乳動(dòng)物體腺之一，有兩對(duì)，棕黃色，分別位于左右兩葉甲狀腺背面的中部和下部，其主要功能為分泌甲狀旁腺，調(diào)節(jié)體內(nèi)鈣、磷的代謝。甲狀旁腺功能減退癥是指甲狀旁腺分泌減少或功能障礙的一種臨床綜合癥。

細(xì)胞特性：

細(xì)胞特性

1 ） 細(xì)胞來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常甲狀旁腺組織。

2 ） 細(xì)胞鑒定： PTH 熒光染色為陽(yáng)性。

3 ） 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于 90% 。

4 ） 不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、、酵母和。

5 ）細(xì)胞生長(zhǎng)方式：梭形，多角形細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。

推薦培養(yǎng)基：

我們推薦使用 Delf 原代上皮 細(xì)胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠血紅素氧合酶1(HO1)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： HO1 ELISA Kit

Mouse coicosterone / coicosterone (CO) ELISA Kit 小鼠皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CO)檢測(cè)試劑盒

Mousetumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand3,AILR3ELISAKit 小鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(AIL-R3)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumancecropinB,CecBELISAKit人殺菌肽B

細(xì)胞C-MET激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitDAT大鼠多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白

M1重組甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/34/Mount Sinai) Matrix protein 1 / M1 蛋白 Protein

PT141(Bremelanotide PT-141 1gPT141(Bremelanotide PT-141) 雌性激素肽

RELT重組人 RELT / TNFRSF19L 蛋白 Protein

FSTL5 Protein Human 重組人 FSTL5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

EFNA3 Protein Human 重組人 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

PT141(Bremelanotide PT-141 1gPT141(Bremelanotide PT-141) 雌性激素肽

FSTL5 Protein Human 重組人 FSTL5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

M1重組甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/34/Mount Sinai) Matrix protein 1 / M1 蛋白 Protein

EFNA3 Protein Human 重組人 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

RELT重組人 RELT / TNFRSF19L 蛋白 Protein

小鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat prostaglandin E2 (PGE2) ELISA Kit 大鼠前列腺素E2(PGE2)檢測(cè)試劑盒

Human8-epi-prostaglandinF2alpha,8-epi-PGF2αELISAKit 人8-異構(gòu)前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanBigEndothelin,BigET檢測(cè)試劑盒人大內(nèi)皮素(BigET)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物總氨基酸含量比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

HumanSuperOxidaseDimase,SODELISAKit人超氧化物歧化酶(SOD)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠甲狀旁腺細(xì)胞豚鼠P物質(zhì)   英文名稱：   Guinea pig Substance P   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   SP

豚鼠睪激素   英文名稱：   Guinea pig Testosterone   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   TESTO

豚鼠免疫球蛋白E   英文名稱：   Immunoglobulin E   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   IgE

豚鼠粘多糖   英文名稱：   Mucopolysaccharide   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   MLC

注意事項(xiàng)：

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。