產(chǎn)品名稱：雙熒光素酶報告基因檢測試劑盒
產(chǎn)品特點：雙熒光素酶報告基因檢測試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品：CULLIN (Cdc53/CUL 0.5mgCULLIN (Cdc53/CUL)ANXA6 Protein Human 重組人 Annexin VI / ANXA6 蛋白 (His 標(biāo)簽)CADM3重組大鼠 CADM3 / NECL1 / IGSF4B 蛋白 Protein
產(chǎn)品型號：
更新日期：2024-11-19
訪問次數(shù)：767
雙熒光素酶報告基因檢測試劑盒的詳細資料：
產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人類或臨床診斷
商品屬性：
產(chǎn)品英文名稱：Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit
產(chǎn)品中文名稱：雙熒光素酶報告基因檢測試劑盒
規(guī)格：100T/1000T
貨號：EY-01X8545
用途：僅供科研研究實驗
特點&優(yōu)勢:
• 發(fā)光強度高。
• 檢測靈敏度高，測定樣品的線性范圍寬。
• 操作便捷，讀值穩(wěn)定，速度快。
• 對各種培養(yǎng)基兼容性強。
保存建議:-20℃，避光保存12個月。
運輸條件:藍冰運輸
背景
在ATP、鎂離子和氧氣存在的條件下，螢火蟲螢光素酶（Firefly luciferase）可以催化螢火蟲螢光素（Luciferin）生成氧化螢光素（Oxyluciferin），在螢光素被氧化的過程中，會產(chǎn)生光信號。在氧氣存在的條件下，海腎螢光素酶（Renilla luciferase）可以催化腔腸素（Coelenterazine）氧化成腸酰胺（Coelenteramide），在腔腸素氧化的過程中也會產(chǎn)生光信號。
本產(chǎn)品具有下列特點:
1.操作簡便、快捷?？芍苯蛹尤氲綑z測平板。在96-孔板中檢測時,無需洗滌或收獲細胞,免去溶解步驟。
2. 無放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。
3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機溶劑來溶解甲臜產(chǎn)物。
4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進一步生成。
操作步驟：
(一)獲得目的基因
1、通過PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計一對引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。
2、通過RT-PCR方法:用TRIzol法從細胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。
(二)構(gòu)建重組表達載體
1、載體酶切:將表達質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點)進行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。
2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。
(三) 獲得含重組表達質(zhì)粒的表達菌種
1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標(biāo)志(抗Amp或藍白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。
2、 測序驗證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點。
3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達宿主菌的感受態(tài)細胞。
(四)誘導(dǎo)表達
1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過夜培養(yǎng)。
2、按1∶50比例稀釋過夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。
3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實驗組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。
4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。
5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。
公司正在出售的產(chǎn)品：
AATK peptide 細胞凋亡關(guān)聯(lián)酪激酶抗原 0.5mgAATK peptide 細胞凋亡關(guān)聯(lián)酪激酶抗原
IFNL1 Protein Human 重組人 IL-29 / Interleukin-29 蛋白
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Humanai-insulieceptoraibody,AIRAELISAKit 人抗胰島素受體抗體(AIRA)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
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肽酶抑制因子3 英文名稱： Human Peptidase Inhibitor 3 規(guī)格： 英文縮寫： PI-3
過氧化物酶體增殖物活化受體γ 英文名稱： Human Peroxisome Proliferators Activated Receptor γ 規(guī)格： 英文縮寫： PPARγ
0酸化SMAD2/3抗體 英文名稱： Human Phosphor Mothers Against Decapeaplegic Homolog 2/3 aib動?動
大鼠聚集蛋白聚糖(AGC)檢測試劑盒 ，英文名： AGC ELISA Kit
Monkey Vascuoar endothelial cell growth factor receptor -3 (VEGFR-3) ELISA Kit血管內(nèi)皮細胞生長因子受體-3(VEGFR-3)檢測試劑盒
RatterminalcomplemecomplexC5b-9,TCCC5b-9ELISAKit 大鼠末端補體復(fù)合物C5b-9(TCCC5b-9)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforFree-T3ELISAKit大鼠游離三甲狀腺原
細胞活力藍色熒光檢測試劑盒50次
RatPhosphotylinosital3kinase,PI3KELISAKit大鼠0酸肌醇3激酶(PI3K)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
雙熒光素酶報告基因檢測試劑盒APOA1重組小鼠 ApoA1 蛋白 Protein
蛋白二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)重組蛋白 Recombinant Protein Disulfide Isomerase (PDI)
RPRD1B重組人 RPRD1B 蛋白 Protein
IFNL1 Protein Human 重組人 IL-29 / Interleukin-29 蛋白
SELL Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD62L / L-Selectin / SELL 蛋白
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