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產(chǎn)品名稱：人結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞

英文名稱：Human Colonic Mucosal Epithelial Cells

組織來源：結(jié)腸組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

人結(jié)腸黏膜上皮分離自結(jié)腸組織；結(jié)腸在右髂窩內(nèi)續(xù)于盲腸，在第3骶椎平面連接直腸。結(jié)腸分升結(jié)腸、橫結(jié)腸、降結(jié)腸和乙狀結(jié)腸4部分，大部分固定于腹后壁，結(jié)腸的排列酷似英文字母“M"，將小腸包圍在內(nèi)。結(jié)腸橫切面由內(nèi)到外依次為：黏膜（上皮層、固有層、黏膜肌層），黏膜下層（疏松結(jié)締組織），肌層（內(nèi)環(huán)形、外縱行兩層平滑?。?，外膜（纖維膜或漿膜）。腸黏膜上皮細(xì)胞是機(jī)體內(nèi)外環(huán)境的重要屏障，持續(xù)暴露于大量抗原中，也是機(jī)體面對(duì)病原微生物的道防線。因此，腸黏膜上皮細(xì)胞除有吸收、分泌和轉(zhuǎn)運(yùn)等重要生理功能之外，在黏膜先天性和獲得性免疫防御機(jī)制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細(xì)胞作為先接觸抗原的細(xì)胞，在黏膜免疫反應(yīng)的起始階段發(fā)揮關(guān)鍵作用，它決定黏膜免疫反應(yīng)的發(fā)生、性質(zhì)和強(qiáng)度。探討正常結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞的分離、體外培養(yǎng)方法，為研究腸黏膜上皮細(xì)胞以及與腸黏膜相關(guān)疾病建立合適的細(xì)胞模型。

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人結(jié)腸黏膜上皮采用先機(jī)械分離法、后膠原酶消化法并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人結(jié)腸黏膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動(dòng)物細(xì)胞的取材是原代細(xì)胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應(yīng)嚴(yán)格無菌

③ 防止機(jī)械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動(dòng)物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細(xì)胞結(jié)合緊密，不利于各個(gè)細(xì)胞在體外培養(yǎng)中生長(zhǎng)繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細(xì)胞解離出來。

(1)懸浮細(xì)胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。

(2)實(shí)體組織材料的分離方法

對(duì)于實(shí)體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機(jī)械分散法

特點(diǎn):簡(jiǎn)便、快速,但對(duì)組織機(jī)械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀)，應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng)，使團(tuán)塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時(shí)再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長(zhǎng)。

豚鼠主要組織相容性復(fù)合體(MHC/GPLA)ELISA 試劑盒

Neonatal rat thyroxine (NN-T4) ELISA Kit 大鼠新生甲狀腺素(NN-T4)檢測(cè)試劑盒

Humangrowthhormonereleasingpeptide-Ghrelin,GHRP-GhrelinELISAKit 人生長(zhǎng)激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanCrosslaps,Cr檢測(cè)試劑盒人骨膠原交聯(lián)(Cr)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織DYRK1A激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次

humanProstaglandinF，PG-FELISAKit人前列腺素F(PGF)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

HA重組甲型流感 H3N2 (A/California/7/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

PBEF (CT 0.5mgPBEF (CT) 內(nèi)脂素/B細(xì)胞克隆增強(qiáng)因子

EPHA7重組人 EphA7 / EHK3 蛋白 Protein

CGREF1 Protein Human 重組人 CGREF1 蛋白

BSG Protein Human 重組人 CD147 / EMMPRIN / Basigin 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

PBEF (CT 0.5mgPBEF (CT) 內(nèi)脂素/B細(xì)胞克隆增強(qiáng)因子

CGREF1 Protein Human 重組人 CGREF1 蛋白

HA重組甲型流感 H3N2 (A/California/7/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

BSG Protein Human 重組人 CD147 / EMMPRIN / Basigin 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

EPHA7重組人 EphA7 / EHK3 蛋白 Protein

小鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human thioredoxin (x) ELISA Kit 人硫氧化還原蛋白(x)檢測(cè)試劑盒

Humancostimulatorymoleculesrecptor,CMRELISAKit 人協(xié)同刺激分子受體(CMR)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Chickeumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand3,AIL-R3檢測(cè)試劑盒雞壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(AIL-R3)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞AIL蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次

MouseEsadiolreceptor,ERELISAKit小鼠雌二醇受體(ER)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞小鼠糖皮質(zhì)激素受體α(GR-α)檢測(cè)試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠糖化血紅蛋白A1c(A1c)檢測(cè)試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠糖化白蛋白(GA)檢測(cè)試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠糖蛋白130(gp130)檢測(cè)試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝