產(chǎn)品名稱：兔胚胎肢芽間充質(zhì)干細胞
產(chǎn)品特點：兔胚胎肢芽間充質(zhì)干細胞公司正在出售的產(chǎn)品ZR-75-30(人癌細胞) 小鼠B淋巴細胞雜交瘤細胞;SH2 Hela, 人細胞系 小鼠成纖維細胞,3T3TK細胞 SPA-A1(肺腺癌細胞) CST3 Others Mouse 小鼠 CST3 / Cystatin-C / Cystatin-3 人細胞裂解液
產(chǎn)品型號：
更新日期：2024-12-13
訪問次數(shù)：341
兔胚胎肢芽間充質(zhì)干細胞的詳細資料：
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細胞簡介：
兔胚胎肢芽間充質(zhì)干分離自胚胎肢芽；胚胎肢芽存在于兩棲類以上的大多數(shù)脊椎動物胚胎中，在四肢發(fā)生的初期階段，在身體兩側(cè)有呈芽狀的突起，內(nèi)部是中胚層側(cè)板的體壁板垱厚形成，表面有表皮覆蓋。在這個中胚層區(qū)肢芽迅速伸長，不久，在其前端即見有指的突起。在此時期間，其內(nèi)部的中胚層分化成軟骨、肌肉等。這些分化組織，在將肢芽作分離培養(yǎng)的時候也可以獲得。根據(jù)對兩棲類的有尾類的研究，作為肢原基各部的胚發(fā)能力，肢芽物質(zhì)的大部分是位于背半部，而前半部主要參與基部形成，后半部參與前端的形成。在實驗上，即使將肢的原基分成二半，每一半調(diào)整好都可形成基本上近于正常形態(tài)的肢體，而且肢體各軸的極性和側(cè)性也逐漸決定。間充質(zhì)干細胞（MSC）是屬于中胚層的一類多能干細胞，主要存在于結(jié)締組織和器官間質(zhì)中，是具有高度自我更新和多向分化潛能的干細胞；這些細胞可以通過分裂維持自身細胞的特性和數(shù)量，并在特定條件下轉(zhuǎn)變成為一種或多種構(gòu)成機體組織或器官的細胞，從而在組織修復(fù)等方面發(fā)揮積極作用。
產(chǎn)品名稱 | 兔胚胎肢芽間充質(zhì)干細胞 | 組織來源 | 胚胎 |
英文名稱 | Rabbit Embryonic Limb Bud Mesenchymal Stem Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡介：
實驗室分離的兔胚胎肢芽間充質(zhì)干采用-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔胚胎肢芽間充質(zhì)干經(jīng)CD90免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳3-5代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔胚胎肢芽間充質(zhì)干體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
注意事項：
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題，責任由客戶自行承擔。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。
9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠能a1A受體(ADRA1A)ELISA 試劑盒
Kappa aibodies to human immunoglobulin light chain (-IgLC) ELISA Kit 輕鏈kappa抗體(κ-IgLC)檢測試劑盒
HumanleucocyteaigenB27,HLA-B27ELISAKit 人類白細胞抗原B27(HLA-B27)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
FishhighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRP檢測試劑盒魚類超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
真菌/酵母蛋白巰基/結(jié)合巰基含量比色法定量檢測試劑盒20次
MouseComplemefragme3a,C3aELISAKit小鼠補體片斷3a(C3a)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
ACE2重組食蟹猴 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 Protein
Insulin protein (from porcine pancreas 0.5mgInsulin protein (from porcine pancreas) 豬胰島素
TLK1重組人 TLK1 / PKU-beta 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
IL18 Protein Human 重組人 IL18 / Interleukin 18 / IGIF 蛋白 (GST 標簽)
IL36B Protein Mouse 重組小鼠 IL1F8 / IL36b 蛋白
Insulin protein (from porcine pancreas 0.5mgInsulin protein (from porcine pancreas) 豬胰島素
IL18 Protein Human 重組人 IL18 / Interleukin 18 / IGIF 蛋白 (GST 標簽)
ACE2重組食蟹猴 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 Protein
IL36B Protein Mouse 重組小鼠 IL1F8 / IL36b 蛋白
TLK1重組人 TLK1 / PKU-beta 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
豚鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human cytotoxic T lymphocyte associated aigen 4 (CTLA-4/CD152) ELISA kit E 人細胞毒性T淋巴細胞相關(guān)抗原4(CTLA-4/CD152)檢測試劑盒E
Humanai-cardiolipinaibodyIgA,ACA-IgAELISAKit 人抗心0脂抗體IgA(ACA-IgA)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumancaneousTcell-atactingchemokine,CTACK檢測試劑盒人皮膚T細胞虜獲趨化因子(CTACK/CCL27)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織EPHB4激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
HumanProgesterone，PROGELISAKit人孕激素/孕同(PROG)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
兔胚胎肢芽間充質(zhì)干細胞瑞氏－姬姆薩復(fù)合染液 Vascular permeability test solion
姬姆薩染液 Peroxidase staining
巴氏染液（脫落細胞染色） Name
快速H－E組織細胞及脫落細胞染液 Phosphate buffer
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