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① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：小鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞

英文名稱：Mouse Microglia Cells

組織來源：腦組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

小鼠神經(jīng)小膠質(zhì)分離自腦組織；大腦分左右兩個(gè)半球，大腦皮質(zhì)(灰質(zhì))覆蓋著每個(gè)大腦半球的大部分，它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。每一個(gè)半球都有三個(gè)面，即外側(cè)面(約占整個(gè)皮質(zhì)面積的1/3)、內(nèi)側(cè)面和底面(占2/3的面積)；半球表面有很多深淺不等的溝或裂，溝或裂之間的隆起叫回，它們大大增加了大腦的表面積；大腦外側(cè)面重要的溝、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔，使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。小膠質(zhì)細(xì)胞是神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的一種，相當(dāng)于腦和脊髓中的巨噬細(xì)胞，是中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)中的道也是主要的一道免疫防線。小膠質(zhì)細(xì)胞大約占大腦中的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的20%，小膠質(zhì)細(xì)胞不停地清除著中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的損壞的神經(jīng)，斑塊及感染性物質(zhì)。無數(shù)臨床上和理學(xué)研究表明激活的小膠質(zhì)細(xì)胞在神經(jīng)退化類疾病的發(fā)病機(jī)理中起到十分重要的作用，如帕金森病、多發(fā)性硬化和阿茲海默癥等。但是過多激活或失控的小膠質(zhì)細(xì)胞會(huì)引起神經(jīng)毒性。它們是促炎因子和氧化應(yīng)激的重要來源，如腫瘤壞死因子(TNF)，一氧化氮，白介素等有神經(jīng)毒性的物質(zhì)。神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞的主要功能：①神經(jīng)膠質(zhì)出現(xiàn)在大腦發(fā)育早期向成熟階段轉(zhuǎn)化的過程中；②當(dāng)程序性細(xì)胞死亡時(shí)，或在大腦發(fā)育的過程中，中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損或受到病理損壞時(shí)，神經(jīng)膠質(zhì)可做為大腦的巨噬細(xì)胞；③膠質(zhì)細(xì)胞能在Ⅱ類組織相容性復(fù)合體表達(dá)CD-4陽性T細(xì)胞時(shí)表達(dá)抗原，能進(jìn)行Fc介導(dǎo)的巨噬作用，并且與造血細(xì)胞和巨噬細(xì)胞組織共享抗原。

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠神經(jīng)小膠質(zhì)采用酶消化法結(jié)合差速貼壁法，在培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)缺失數(shù)天后經(jīng)搖床震蕩收集脫落細(xì)胞制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠神經(jīng)小膠質(zhì)經(jīng)CD11b免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群

消化液 （12mM）

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動(dòng)物細(xì)胞的取材是原代細(xì)胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應(yīng)嚴(yán)格無菌

③ 防止機(jī)械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動(dòng)物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細(xì)胞結(jié)合緊密，不利于各個(gè)細(xì)胞在體外培養(yǎng)中生長(zhǎng)繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細(xì)胞解離出來。

(1)懸浮細(xì)胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。

(2)實(shí)體組織材料的分離方法

對(duì)于實(shí)體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機(jī)械分散法

特點(diǎn):簡(jiǎn)便、快速,但對(duì)組織機(jī)械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀)，應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng)，使團(tuán)塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時(shí)再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長(zhǎng)。

大鼠神經(jīng)蛋白聚糖(NCAN)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： NCAN ELISA Kit

Mouse cardiac oponin I (cTn- I) ELISA Kit 小鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)檢測(cè)試劑盒

RatMyosinELISAKit 大鼠肌球蛋白(Myosin)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHB-Beta(HumanBeta-subunitsofhemoglobin)ELISAKit人血紅蛋白β亞基

細(xì)胞半胱蛋白酶-4(CASPASE-4)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20次

RatVitaminC,VCELISAKit大鼠C(VC)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

IGFBP3重組食蟹猴 IGFBP3 蛋白 Protein

Melamine/OVA(ovalbumin 5mgMelamine/OVA(ovalbumin) 三聚胺與雞卵白蛋白偶聯(lián)物

AK4重組人 AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

GCSH Protein Human 重組人 GCSH 蛋白

CD24 Protein Mouse 重組小鼠 CD24 / Ly-52 / CD24A 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

Melamine/OVA(ovalbumin 5mgMelamine/OVA(ovalbumin) 三聚胺與雞卵白蛋白偶聯(lián)物

GCSH Protein Human 重組人 GCSH 蛋白

IGFBP3重組食蟹猴 IGFBP3 蛋白 Protein

CD24 Protein Mouse 重組小鼠 CD24 / Ly-52 / CD24A 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

AK4重組人 AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

小鼠白介素7(IL-7)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human melatonin (MT) ELISA Kit 人褪黑素(MT)檢測(cè)試劑盒

Humanurokinase,UKELISAKit 人(UK)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanCalfiestinalalkalinephosphatase,CIAP檢測(cè)試劑盒人牛小腸堿性0酸酶(CIAP)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

干細(xì)胞熒光定性檢測(cè)試劑盒20次

Humansolublemyosinheavychain1,sMHC-1ELISAKit人可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞兔子內(nèi)皮抑素檢測(cè)試劑盒   兔子內(nèi)皮抑素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子內(nèi)皮抑素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子內(nèi)皮抑素試劑盒、兔子內(nèi)皮抑素檢測(cè)試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

兔子甲狀腺素檢測(cè)試劑盒   兔子甲狀腺素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子甲狀腺素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子甲狀腺素試劑盒、兔子甲狀腺素檢測(cè)試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

兔子Ⅱ檢測(cè)試劑盒   兔子Ⅱ試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子Ⅱ試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子Ⅱ試劑盒、兔子Ⅱ 檢測(cè)試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

兔子受體檢測(cè)試劑盒   兔子受體試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子受體試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：檢測(cè)試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子受體試劑盒、兔子受體檢測(cè)試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用